Запорожская-Абрамова Е.С., Косырева Т.Ф.
Желатиновые пластины с экстрактами трав и глицерофосфатом кальция для пролонгированной реминерализации зубов в эксперименте.
Российский университет дружбы народов, г. Москва
Кафедра детской стоматологии и ортодонтии
В данном докладе рассматривается воздействие фитопрепарата в виде адгезивных внутриротовых пластин на основе желатина с добавлением глицерофосфата кальция в качестве реминерализующего средства на эмаль свежеудаленных постоянных зубов у детей в возрасте 11лет.
Ключевые слова: эмаль несформированных зубов, электронная микроскопия, фитопрепараты.
We studied the results of tooth enamel of children ages 11 years after prolonged exposure to glelatin plates with herbs and calcium glycerophosphate as remineralization means in experiment.
Key words: enamel, electron microscopy, herbs.
Одним из наиболее перспективных направлений современной профилактической медицины в настоящее время является применение фитопрепаратов, которые благодаря наличию в них микроэлементов, витаминов, биогенных веществ, обладают не только выраженным местным действием, но и повышают общую резистентность организма [6].
В зарубежной и отечественной специальной литературе отсутствуют исследования воздействия адгезивных лечебно-профилактических препаратов растительного происхождения пролонгированного действия в виде биопленок на эмаль постоянных зубов у детей [3,4,7,5,8,9].
По данным Балабанова В.И. (2009) [2] и Ананьева В.Н. (2010) [1] определяющая роль в терапевтической системе и в традиционной лекарственной форме принадлежит носителю. Именно от него зависит скорость и полнота высвобождения действующего вещества в организме, а, следовательно, степень терапевтической эффективности препарата. Биопленки как иммобилизованные препараты преимущественно местного действия, выгодно отличаются от традиционных лекарственных форм. Растворение обычных лекарственных средств в желатине, ведёт к образованию наноструктур составляющих веществ. В результате лекарственные пленки начинают обладать новыми свойствами лекарств.
Целью исследования явилось проведение электронной микроскопии эмали свежеудаленных зубов на высоких разрешениях после пролонгированного воздействия биопленкой растительного происхождения «Пластина ЦМ2».
Исследовались свежеудаленные по ортодонтическим показаниям (давностью до 3 часов) первые премоляры шести детей в возрасте 11лет.
Удаленный зуб промывали дистиллированной водой и помещали в стерильную пробирку с ротовой жидкостью пациента. Пробирка помещалась в контейнер со льдом. В течение 3 часов после удаления пробирка доставлялась в лабораторию Центра коллективного пользования (Научно-образовательный центр) РУДН в лабораторию электронной микроскопии.
Зуб в лаборатории промывали от ротовой жидкости дистиллированной водой. Был применен растровый электронный микроскоп Jeol «JSM-6490LV» (Япония). Модель JSM-6490LV оснащена системой низкого вакуума, позволяющей наблюдать водонасыщенные или непроводящие образцы без напыления, что важно для изучения жизнеспособных материалов и не способствует механическому повреждению поверхностного слоя. Эвцентрический столик образцов, которым комплектуется данный прибор, позволяет изучить объекты диаметром до 8 дюймов.
Снимки электронным микроскопом делались при ускоряющемся напряжении от 10 до 20 мА с увеличением в 500, 650, 4000 и 5000 мкм.
Искусственные деминерализованные поражения получали путем нанесения на вестибулярную поверхность в пришеечной области 37% ортофосфорной кислоты в течение 30 секунд, промывали дистиллированной водой, слегка подсушивали автоматическим анализатором влагосодержания «AND MX-50». Далее проводили электоронно-микроскопическое исследование ультраструктуры эмали.
После проведения искусственной деминерализации твердых тканей на вестибулярную поверхность эмали зуба на 9 часов накладывалась «Пластина ЦМ2» (желатиновые пленки с экстрактами трав и глицерофосфатом кальция). Для этого зуб помещался в стерильную пробирку с ротовой жидкостью пациента в холодильник при t=4˚ продолжительностью на 9 часов.
После этого зуб промывали дистиллированной водой, слегка подсушивали автоматическим анализатором влагосодержания и повторно проводили электоронно-микроскопическое исследование ультраструктуры эмали.
Состав «Пластин ЦМ-2»: включает сухие водорастворимые лиофилизированные экстракты лекарственных растений (цветков зверобоя, травы тысячелистника, шалфея, плодов шиповника, корня солодки), витамины С, В1, комплекс природных минеральных веществ и желатин (специально обработан до низко молекулярного уровня) с терапевтической дозировкой глицерофосфата кальция. Сертификат соответствия на изделие медицинского назначения от 25.03.2007 г. ФСР 2007, 00192.
Изучение структуры поверхности эмали постоянных зубов сканирующим электронным микроскопом при ускоряющем напряжении 20 кВ показало, что она имеет однородную структуру, на которой имеются естественные, хаотично расположенные царапины, борозды, микротрещины, небольшие углубления диаметром 4-23 мкм и сколы эмали. Кроме этого, четко прослеживаются продольно ориентированные волокнистые структуры эмали. При большом увеличении отчетливо прослеживается закрытые выходы эмалевых призм на поверхность эмали, причём в пришеечной области зуба количество естественных царапин и углублений увеличивается.
После проведенной искусственной деминерализации эмали ортофосфорной кислотой 37% в течении 30 секунд, с последующим промыванием дистиллированной водой и подсушиванием, в области искусственной деминерализации твердая ткань становится пористой, наблюдается раскрытие выходов эмалевых призм на поверхности эмали.
Проведенные нами экспериментальные исследования по изучению структуры поверхности эмали постоянных зубов после пролонгированного воздействия адгезивной пластины растительного происхождения с глицерофосфатом кальция и экстрактами трав в ротовой жидкости пациента показали, что ее поверхность покрывается ровным гомогенным слоем препарата.
При малом увеличении было выявлено, что структура слоя достаточно однородная, гладкая, при этом в отдельных местах можно увидеть небольшие углубления, не нарушающие целостность защитного слоя.
На электронограммах при увеличении в 3300 раз отчетливо видно, что реминерализующий гомогенный слой способен проникать в глубину трещины эмали в виде «мостиков». Глубина проникновения препарата варьирует от 4,1 до 5,5 мкм.
При увеличении в 4000 раз хорошо видны эмалевые призмы, покрытые плотным слоем препарата, обтурирующим микротрещины.
При изучении сколов эмали видна поверхность в виде гребней с эмалевыми призмами. После воздействия «ПластинЦМ2» на их поверхности было выявлено наличие защитного слоя препарата, способного заполнить микропространства в эмали, образованных под воздействием внешних факторов.
После экспериментального наложения на эмаль зубов адгезивной «Пластины ЦМ2» сверху на эмаль было проведено однократное воздействие фторлаком «Профилакор». При этом при микроскопии отмечена однородность покрытия поверхности эмали и сглаженность ее структур.
Полученные экспериментальные данные явились обоснованием применения фитопрепарата в виде адгезивных внутриротовых пластин на основе желатина с добавлением глицерофосфата кальция в качестве реминерализующего средства для профилактики кариеса зубов.
Преимуществом «Пластина ЦМ-2 с кальцием» является создание на поверхности эмали определенной дозированной концентрации ионов кальция, а наличие экстрактов растений, витаминов и минеральных веществ обуславливают сочетание местного противокариозного и противовоспалительного действия с пролонгированным эффектом. Данные электронной микроскопии эмали постоянных зубов до и после воздействия желатиновой пластиной растительного происхождения «Пластиной ЦМ2» с глицерофосфатом кальция на высоких разрешениях в области деминерализации доказывают наличие адгезии и формирование стабильного гомогенного слоя препарата с образованием наноструктур, входящих в лекарственную форму веществ.
Литература:
1. Ананьева В.Н. Лекарственные желатиновые пленки в медицине. XI международный конгресс «Здоровье и образование в XXI веке». «Научные и прикладные аспекты концепции здоровья и здорового образа жизни». Россия, Москва 8-12 декабря 2010.- С.20-21
2. Балабанов В.И. Нанотехнологии. И. Наука будущего.- И: Эксмо. 2009.-256 с.
3. Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. - М: Медицинская книга, Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2001. – 304 с.
4. Кунин А.А. и др. Растровая электронная микроскопия и рентгеноспектральный микроанализ структуры и химического состава твердых тканей зуба. Современные методы профилактики, диагностики и лечения важнейших заболеваний: Материалы. Воронеж: ВГМА, 1998; С.101—102.
5. Леонтьев В.К. и др. Особенности микроструктуры эмали и дентина интактных и кариозных зубов: Материалы. М 2002; С. 59—62.
6. Мануйлов Б.М. Некоторые особенности фитотерапии в стоматологии. Методические рекомендации. Москва – 2005. – 57 с.
7. Марченко А.И., Зелинская Н.А., Даценко В.Я. и др. Изучение ультраструктуры поверхности эмали зубов человека с помощью растровой электронной микроскопии. Стоматология 1990; 3: С. 6-8.
8. Kunin A.A. et al. Scanning electron microscopy and microchemical analysis of enamel and dentin in norm and caries under low-intensity laser irradiation influence. Europe biomedical optics week, BIOS Europe, 4—9 Jule. Amsterdam: Abstract Book 2000;23: 4159.
9. Yamakoshi Y. et al. Calcium binding of enamel proteins and their derivatives with emphasis on the calcium-binding domain of porcine sheathlin. Arch Oral Biol 2001; 46: 1005—1014.